309路公交车是一条在南京开行的公交线路。该线路起于肖家河街道办事处,止于南站客运中心。途径玄武区、鼓楼区、建邺区、江宁区,全程29公里1645米,共设66个站点。本线路主要服务的区域包括仙鹤门社区、进香桥街道、夫子庙街道、常府街道、弘景湾社区、龙眠街道、迎春村社区、盘城街道、东山街道、草场门街道、秦淮河畔街道、梅园新村、新街口街道、瑞金路街道、莫愁湖街道、红山街道、五塘街道、科学园区街道等。
该路线运营时间为5:20-22:20,票价为人民币二元整,车身以红色为主色调,车辆全部配备空调,定点停靠,车内设置了公交卡充值厅,并设有工作人员提供帮助。